SFM-101培地「ニッスイ」SFM-101 “Nissui”

製品コード

05963

統一商品コード

302059638

JANコード

4987302059638

包装

1 L分

使用期限

1年間

貯蔵方法

密栓冷所(2~10℃) 防湿

製品概要

無血清培地
炭酸水素ナトリウム不含

SFM-101培地「ニッスイ」は、RPMI 1640とイーグルMEMを等量混合したものにチミジン、セレンなど数種の成分を加え、アミノ酸量も再調整したものを基礎培地とし、これにインスリン、トランスフェリンおよびモノエタノールアミンを加えた無血清合成培地である。

特長
1.インスリン、トランスフェリン以外のタンパク質成分を含んでいないため、FBSやアルブミンのようにロット間差による細胞増殖能の変動という問題が無い。
2.含有タンパク質濃度が低いので、培養上清液から細胞産性物質を回収する際の精製が非常に簡単である。
3.マウスハイブリドーマ細胞の増殖促進と抗体産生能向上を目的に調製されているが、ヒトリンパ球系の細胞等にも広く応用できる。
4.マウスミエローマP3U-1、NS-1細胞を親株としてハイブリドーマ細胞を作る際には、HAT選択が不要である。さらに、これら細胞をフィーダー細胞として用いることにより、ハイブリドーマ細胞のクローニングを行うことができる。
5.基礎培地とサプリメントから成るため、培地の調製が容易である。

注意
本基礎培地は亜セレン酸ナトリウムを含有しているが、極微量(0.00011%以下)のため、医薬用外毒物には該当しない。

使用法

1.基礎培地1瓶の全量(12.5 g)を蒸留水約900 mLに完全に溶解する。CO2ガスでpHを6.0ぐらいまで下げると溶解しやすくなる。
2.サプリメントAに蒸留水10 mLを加え、完全に溶解する。
3.基礎培地にサプリメントA、B全量を加え、さらに炭酸水素ナトリウムを適量(培地1 L当たり1~1.5 gを加えた場合、5%CO2ガス下、37℃での培地pHは7.1~7.4になる)加え、蒸留水で全量を1,000 mLにする。
4.十分混和後、直ちにろ過滅菌する。
5.培地調製後、すぐに使用しない場合は、密栓して冷暗所(2~10℃)に保存する。

注意
① 培地をろ過滅菌する際、タンパク質成分のフィルターへの吸着を避けるために、タンパク質低吸着フィルターを使用する。
② 一度溶解したサプリメントAを使いきれない場合は、-20℃以下に保存すれば再度使用できる。ただし、くり返し凍結融解することは避ける。
③ 調製した培地の保存は2ヵ月以内とする。

組成

〔セットの内容〕

基礎培地12.5 g(1 L用)×1本
サプリメントA10 mL用(1 L用)×1本
サプリメントB5 mL(1 L用)×1本

基礎培地12.5 g(1 L分)中

塩化ナトリウム6,000 mg
塩化カリウム400 mg
塩化カルシウム(無水)100 mg
硝酸カルシウム(四水和物)50.4 mg
硫酸マグネシウム(無水)71 mg
リン酸二水素ナトリウム(二水和物)75 mg
リン酸水素二ナトリウム(二水和物)502 mg
亜セレン酸ナトリウム0.002 mg
L-アルギニン100 mg
L-アルギニン塩酸塩78 mg
L-アスパラギン(一水和物)43.4 mg
L-アスパラギン酸10 mg
L-システイン塩酸塩水和物15.7 mg
L-シスチン二塩酸塩32.5 mg
L-グルタミン酸10 mg
L-グルタミン600 mg
グリシン10 mg
L-ヒスチジン7.5 mg
L-ヒスチジン塩酸塩水和物21 mg
L-ヒドロキシプロリン10 mg
L-イソロイシン51 mg
L-ロイシン51 mg
L-リジン塩酸塩56.5 mg
L-メチオニン15 mg
L-フェニルアラニン23.5 mg
L-プロリン15 mg
L-セリン30 mg
L-トレオニン49 mg
L-チロシン28 mg
L-トリプトファン7.5 mg
L-バリン48 mg
ρ-アミノ安息香酸0.5 mg
D-ビオチン0.2 mg
重酒石酸コリン0.9 mg
塩化コリン26.5 mg
葉酸1 mg
myo-イノシトール18.5 mg
ニコチン酸アミド1 mg
パントテン酸カルシウム0.6 mg
ピリドキサール塩酸塩0.5 mg
ピリドキシン塩酸塩0.5 mg
リボフラビン0.15 mg
チアミン塩酸塩1 mg
シアノコバラミン0.004 mg
ブドウ糖2,000 mg
ピルビン酸ナトリウム110 mg
コハク酸37.5 mg
コハク酸二ナトリウム(無水)50 mg
ヒポキサンチン0.025 mg
チミジン0.013 mg
グルタチオン0.5 mg
プトレッシン二塩酸塩0.013 mg
ジヒドロキシエチルグリシン1,800 mg
フェノールレッドナトリウム塩5 mg

サプリメントA(凍結乾燥品)

10 mL用(1 L用)中

インスリン(ウシ)10 mg
トランスフェリン(ヒト・ホロ型)10 mg

サプリメントB(液状)

5 mL(1 L用)中

モノエタノールアミン20 mg

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